Автор неизвестен - Анатолій якович циганенкодо 75-річчя від дня народження - страница 34

Страницы:
1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50 

1 сегментоядерные лейкоциты; 2 молодые гистиоциты; 3 вакуолинизиро-ванные гистиоциты; 4 макрофаги; 5 фибробласты; 6 недифференцирован-

ные клетки

нялась и более мелкая зернистость. Появля­лись недифференцированные клеточные фор­мы, молодые гистиоциты, вакуолинизирован-ные гистиоциты, количество которых к 8­12 часам было достаточно большим (+ +).

К 24-м часам вся поверхность раны по­крывалась множеством клеток, основными из которых были недифференцированные (+ + +) и молодые гистиоциты (+ + + +). Число мак­рофагов представлено (+), а еще через сутки (+ +). В этот срок появлялись и единичные фибробласты.

Раннее появление большого количества недифференцированных клеток и молодых гистиоцитов приводило к раннему заполне­нию раневого дефекта клетками молодой со­единительной ткани.

Сроки заживления ран (в часах) в обеих группах животных были следующими:

При спонтанном заживлении

108 96

108

96 96

При обработке 4%-ным раствором NaHCO3

72 60 72 60 60 84 60

108 84

96 60

108 72

96 72

108 60

84 60

99,0±2,61 66,0±2,45;

t=9,4 (p<0,0001)

Таким образом, дезинтеграция вышедших в рану сегментоядерных лейкоцитов являет­ся естественным биологическим процессом, который начинает проявляться уже в 1-е су­тки после нанесения раны. Ускорение этого процесса в тот период, когда сегментоядерные лейкоциты в большом количестве присутству­ют в ране, может способствовать скорейшему появлению в ней клеток молодой соедини­тельной ткани.

Нейтрофилы природа наделила большим количеством лизосом [8]. Как отмечено в по­следние годы, функция лизосом в организме не ограничивается процессом внутриклеточ­ного гидролиза субстратов [10]. Имеются дан­ные о внеклеточном гидролизе биополимеров, который идет за счет гидролаз, секретируе-мых во внешнюю среду путем экзоцитоза, ли­

а

о за счет ферментов лизосом, которые оказы­ваются во внешней среде после разрушения клетки [6, 11]. Именно одномоментным вы­свобождением большого количества лизосо-мальных ферментов из дезинтегрированных под действием 4%-ного раствора NaHCO3 сег-ментоядерных лейкоцитов и вследствие это­го быстрым очищением раны от погибших клеток может быть объяснен быстрый переход раневого процесса в фазу регенерации в нашем эксперименте.

Заживление ран причинно не связано с со­хранением жизнеспособности вышедших в ра­ну нейтрофилов. Дезинтеграция всех сегмен-тоядерных лейкоцитов, накопившихся в ра­не к 24 часам после ее нанесения 4%-ным рас­твором бикарбоната натрия, не только не сни­жает шансы на репарацию, но и, напротив, способствует быстрому появлению клеток мо­лодой соединительной ткани в эксперимен­тальной ране и скорейшему ее заживлению.

Выводы

Список литературы

1. Петров С.В. Общая хирургия. СПб.: Лань, 1999. 672 с.

2. Раны и раневая инфекция: Руководство для врачей. Под ред. М.И. Кузина, Б.М. Костюченок.

М.: Медицина, 1990. 592 с.

3. Безугла О.П., Бєлов С.Г., Гунько В.Г. та ін. Теорія та практика місцевого лікування гнійних ран. За ред. Б.М. Даценка. К.: Здоров'я, 1995. 384 с.

4. Жадинский Н.В. К вопросу об участии сегментоядерных лейкоцитов в регенеративных процес­сах. Медико-соціальні проблеми сім'ї 1999; 4, 2: 54-56.

5. Макаров М.С. Роль гранулоцитов в процессе воспалительной регенерации по данным сравни­тельного цитологического исследования. Ставрополь: Кн. изд-во, 1975. 232 с.

6. Дейл М.М. Нейтрофильные лейкоциты: Руководство по иммунофармакологии. Под ред. М. Дей-ла и Д. Формена. М.: Медицина, 1998: 32-48.

7. Жадинский Н.В. Построение и анализ системы «Воспалительный процесс и регенерация в гной­ной ране». Медико-соціальні проблеми сім'ї 2000; 5, 2-3: 52-56.

8. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск: Наука, 1989.

344 с.

9. Жадинский Н.В. Влияние различных факторов на процесс трансформации нейтрофилов в мо­ноядерные клетки в опытах in vitro. Медико-соціальні проблеми сім'ї 2000; 5, 1: 62-65.

10. Кокряков В.И. Катионные белки лизосом нейтрофильных гранулоцитов при фагоцитозе и вос­палении. Вопр. мед. химии 1990; 6: 13-16.

11. Короленко ТА. Биохимические аспекты лизосомотропизма. Новосибирск: Наука, 1983. 118 с.

ВПЛИВ ДЕЗІНТЕГРАЦІЇ СЕГМЕНТОЯДЕРНИХ ЛЕЙКОЦИТІВ, ЩО ВИЙШЛИ В РАНУ, НА ТЕРМІНИ ЗАГОЄННЯ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ РАН

М.В. Жадінський, Ф.І. Гюльмамєдов, Ю.І. Ніколенко, А.М. Жадінський

В експериментах на щурах зі шкірними ранами показано, що дезінтеграція сегментоядерних лей­коцитів 4%-вим розчином бікарбонату натрію у рані через 24 години після її нанесення не знижує шансів на репарацію. Навпаки, такий вплив сприяє більш швидкій, ніж у контролі, появі клітин молодої сполучної тканини та скорішому загоєнню ран.

Ключові слова:рани, загоєння, сегментоядерні лейкоцити, бікарбонат натрію.

INFLUENCE OF DISINTEGRATION OF COMING INTO THE WOUND SEGMENT-NUCLEAR LEUCOCYTES

ON PERIOD OF HEALING THE EXPERIMENTAL WOUNDS

N.V. Zadinskiy, F.I. Gulmamedov, Yu.I. Nikolenko, A.N. Zadinskiy

It was stated during the experiments on the rats with skin wounds that the disintegration of segment-nuclear leucocytes by 4% solution of bicarbonatis-natrium into the wounds in 24 hours of its bringing, didn't reduce the chances on reparation. On the contrary, such influence promotes more rapid, than in the control group, appearance of cells of connective tissue and faster healing of the wounds.

Key words: wounds, healing, segment-nuclear leucocytes, bicarbonatis natrium.

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ РЕАКТИВНОСТЬ ПРИ МЕСТНЫХ ЛУЧЕВЫХ ПОВРЕЖДЕНИЯХ КОЖИ

Т.В. Звягинцева

Харьковский государственный медицинский университет

На модели местного лучевого повреждения кожи у крыс исследованы общие и локальные иммунологические реакции. В иммунологическом ответе организма на местное лучевое воздействие наиболее характерные изменения развиваются в очаге и характеризуются угнетением инфильтративных явлений. Нарушение лейкоцитарной реакции очага про­является в уменьшении аккумуляции в очаге нейтрофилов и моноцитов, задержке эли­минации последних. Персистирующие воспалительные явления лежат в основе несостоя­тельности заживления. Основные особенности общих иммунологических реакций связа­ны со специфическими звеньями иммунитета: нарушениями Т-системы, развитием ау­тоиммунных процессов. Полученные данные позволяют считать локальную иммунокор-рекцию наиболее перспективным методом лечения местных лучевых повреждений. Ключевые слова: местные лучевые повреждения, иммунокоррекция, заживление.

Защиту организма от повреждений любой природы определяют неспецифические и спе­цифические механизмы иммунитета, локаль­ные и общие, связанные между собой.

Анализируя накопленные литературные данные о местном влиянии ионизирующего излучения, можно прийти к заключению о двояком его действии. Во-первых, радиация оказывает локальное действие, вызывая изме­нения клеток гематогенного, сосудистого, эпителиального, стромального происхожде­ния, волокнистых структур, микроциркуля-торного русла. Во-вторых, есть свидетельства изменений функций нервной, эндокринной, иммунной систем, и это может влиять на ха­рактер процессов в очаге. В конечном итоге со­вокупность местных и общих, прямых и опо­средованных влияний, по-видимому, опреде­ляет характер местных лучевых поврежде­ний. Следовательно, всесторонне оценить со­стояние иммунной системы организма в ре­зультате действия локального облучения можно лишь при одновременном исследова­нии как минимум двух составляющих: пер­вой — реакции иммунной системы в целом на формирование лучевых реакций и поврежде­ний кожи и второй — иммунологических по­казателей в очаге лучевого повреждения. Это и составило цель настоящего исследования, из которой вытекают две основные задачи: пер­вая — исследование общих и вторая — ло­кальных иммунологических реакций при ме­стном действии ионизирующего излучения.

Материал и методы. Опыты проведены на 120 крысах популяции Вистар массой 180­220 г в соответствии с «Правилами проведе­ния работ с использованием эксперименталь­ных животных». Для воспроизведения радио­индуцированных повреждений кожи исполь­зовали однократное локальное рентгеновское облучение участка задней конечности в дозе 70 Гр у одной группы животных (60 крыс) по разработанной методике [1]. У другой группы животных (также 60 крыс) воспроизводили механическое повреждение путем удаления участка кожи. Площадь и локализация поля облучения соответствовали площади и лока­лизации механического повреждения. Иссле­дования проводили в интервале 1-30 суток по­сле воздействия лучевого и механического агентов. Тестами неспецифической резистент­ности служили фагоцитарная активность ней-трофилов в отношении S. aureus: индекс Гам­бургера (ИГ) — процент активно фагоцити­рующих нейтрофилов, индекс Райта (ИР) — среднее число микробных клеток, поглощен­ных одним активным нейтрофилом, индекс переваривания (ИП). Определяли также коли­чество Т-лимфоцитов в периферической кро­ви с помощью реакции розеткообразования с эритроцитами морской свинки, уровень лим-фоцитотоксических антител и реакции связы­вания комплемента (РСК) с экстрактом кожи [2]. Кусочки облученной кожи фиксировали в нейтральном 10%-ном формалине, подвер­гали спиртовой проводке, заливали парафи­ном. Срезы толщиной 5-6 мкм окрашивали гематоксилином-эозином, пикрофуксином по ван-Гизон, Шифф-йодной кислотой, а также на ДНК по Фельгену-Россенбеку и на РНК по Браше. Результаты экспериментов обработа­ли статистически с использованием критерия Стьюдента.

Результаты и их обсуждение. Решению первой задачи настоящего исследования — изучению общих иммунологических реакцийв ответ на действие локального облучения, по­священ ряд наших предыдущих работ [3, 4]. Из результатов этого этапа работы вытекает, что абсолютное количество лейкоцитов пери­ферической крови снижается в обеих группах через сутки, оставаясь на низком уровне в те­чение трех суток у крыс, подвергнутых меха­ническому воздействию; у облученных живот­ных лейкопеническая фаза продолжается до конца исследования. При этом лейкопения развивается в основном за счет уменьшения количества лимфоцитов и в меньшей степе­ни — моноцитов. Число нейтрофилов нахо­дится в пределах физиологических колеба­ний, исключая 3-и сутки у облученных крыс, когда отмечается снижение количества сег-ментоядерных нейтрофилов. В обеих группах динамика показателей фагоцитарной актив­ности нейтрофилов имеет фазный характер и во многом схожа. Ранний этап лейкопениче-ской фазы (3-и сутки) совпадает по времени со снижением ИГ и ИР и одновременным увели­чением ИП, особенно у облученных живот­ных, что может отражать компенсаторную ре­акцию на снижение количества фагоцитов и временное падение поглощающей активно­сти; ИР в обеих группах на 7-е сутки имеет тенденцию к увеличению, а на 15-е — возвра­щается к показателям, близким к исходному уровню.

Показатели, характеризующие динамику комплемента и нормальных гемолизинов, также однотипны в обеих группах. Они име­ют двухвершинный характер с максимумами на 3-и и 15-е сутки и минимумами на 1-е, 7-е и 30-е сутки. Фазовое увеличение комплемен­тарной активности и уровня гемолизинов, ви­димо, связано с разрушением фагоцитов и ос­вобождением эндогенных цитолизинов. При этом колебания показателей у облученных животных имеют большую амплитуду, чем у животных с механическим повреждением.

Таким образом, динамика изученных кле­точных (фагоцитоз) и гуморальных (компле­мент, гемолизины) факторов неспецифиче­ской иммунологической реактивности на фо­не механического и местного лучевого повре­ждения имеет качественно подобный харак­тер, а разница касается преимущественно ко­личественных характеристик: изменения у облученных животных имеют большую ам­плитуду в сравнении с изменениями после ме­ханического повреждения. Этот факт принци­пиально важен, поскольку указывает на весо­мый вклад неспецифической компоненты в комплексную реакцию факторов неспецифи­ческой иммунологической реактивности на механическое и радиационное повреждение. Возникает вопрос о природе неспецифических сдвигов при действии местного облучения.

Скорее всего, ее основу составляет местная воспалительная реакция, поскольку по Селье местное воспаление представляет форму ло­кального стресса.

Более достоверными оказываются измене­ния специфических звеньев иммунологиче­ской реактивности. Прежде всего это касает­ся Т-лимфоцитов. Их количество при механи­ческой травме снижается только на протяже­нии 1-15 суток, возвращаясь затем к исход­ным значениям; при радиационной травме число Т-лимфоцитов неуклонно уменьшается, причем прогрессирующее снижение прихо­дится на 15-30-е сутки.

Принципиально отличается в обеих груп­пах динамика ЦИК. У животных с механиче­ским повреждением их уровень был довольно стабилен, у облученных — на 15-е сутки име­ло место пикообразное повышение, которое уменьшалось на 30-е. Резкое увеличение уров­ня ЦИК у облученных животных объясняет­ся, скорее всего, развитием иммунного отве­та на аутоантигены, которые образуются в хо­де разрушения поврежденных лучевой трав­мой тканей.

Таким образом, хотя важная роль неспе­цифических механизмов иммунологической реактивности в патогенезе локальных луче­вых повреждений кожи очевидна, данное об­стоятельство не может служить отрицанием наличия специфических радиогенных патоге­нетических звеньев. При этом локальное по­вреждение вызывает масштабную и длитель­ную общую реакцию иммунной системы.

Решение второй задачи — изучение ло­кальных иммунологических реакций, потре­бовало морфологических исследований [5].

Как и следовало ожидать, развитие раны вследствие механического повреждения сопро­вождалось характерной для воспаления акку­муляцией лейкоцитов в очаге с доминировани­ем в воспалительном инфильтрате на 1-е сутки после нанесения раны полиморфно-ядерных лейкоцитов, а затем, на 3-и и 7-е сутки, макро­фагов. На 3-и сутки из «глубины» (дна) раны происходит рост грануляционной ткани с ти­пичными клеточными элементами (макрофа­ги, фибробласты), на 7-е сутки вся зона повре­ждения выполнена грануляционной тканью и начинается процесс ее созревания. Закономер­ные изменения наблюдаются и в эпидермисе: в ранние сроки в зоне повреждения он утолщен и дистрофизирован, в прилежащей зоне отме­чаются признаки гиперпролиферации и повы­шенной морфофункциональной активности, а в срок эпителизации сформировавшегося руб­ца зона морфофункциональной активации эпи­дермиса значительно суживается.

Лейкоцитарная реакция кожи на облуче­ние отличается крайней скудностью. Некото­рое количество макрофагов и нейтрофилов об­наруживается лишь через неделю после облу­чения. Негустой инфильтрат (макрофаги, лим­фоциты, полиморфно-ядерные лейкоциты) с доминированием макрофагов обнаруживается на 15-21-е сутки. Только на 15-21-е сутки в участках деэпителизации кожи и некроза дер­мы происходит формирование грануляцион­ной ткани, отграничивающей очаг некроза от живых структур. Грануляционная ткань луче­вой язвы характеризуется небольшим количе­ством сосудов и слабым инфильтратом с доми­нированием макрофагов и фибробластов. Бы­строта последующей регенерации с эпителиза-цией дефекта зависит от выраженности и пол­ноценности грануляционной ткани вокруг оча­га некроза. Последнее происходит в результа­те пролиферации эпидермоцитов вокруг луче­вого повреждения и сохранившихся глубоких отделов волосяных луковиц.

ствием радиации, характеризуется угнетени­ем инфильтративных явлений. Нарушение лейкоцитарной реакции очага проявляется в уменьшении аккумуляции в очаге нейтрофи-лов (вплоть до их отсутствия) и моноцитов, за­держке элиминации последних. Персисти-рующие воспалительные явления лежат в ос­нове нарушения фибробластической реакции, слабого развития грануляционной ткани, за­держки эпителизации и, в конечном счете, не­состоятельности заживления.

2. Основные различия в общих иммуноло­гических реакциях касаются специфических звеньев иммунитета. При местных лучевых реакциях и повреждениях кожи иммунные реакции характеризуются прежде всего нару­шениями Т-системы, развитием аутоиммун­ных процессов. Показатели неспецифической иммунологической реактивности подобны за­фиксированным при механической травме.

1. В иммунологическом ответе организма на местное лучевое воздействие наиболее ха­рактерные отклонения развиваются непосред­ственно в очаге. Воспаление, вызванное дей-

Выводы

3. В свете полученных данных, ни сколь не умаляя значения широко распространен­ных методов коррекции иммунологического статуса, локальная иммунокоррекция мест­ных лучевых повреждений обещает дать более эффективные результаты.

Список литературы

1. Звягінцева Т.В. Моделювання місцевих променевих пошкоджень шкіри. Фізіол. журн. 1998;

44, 56: 106-112.

2. Иммунологические методы. Под ред. Т. Фримеля; Пер. с нем. М.: Медицина, 1987. 518 с.

3. Звягінцева Т.В., Коляда Т.І. Порівняльна характеристика реакцій неспецифічної резистентності на механічне та місцеве радіаційне пошкодження. Одеськ. мед. журн. 2001; 1: 17-19.

4. Звягинцева Т.В., Коляда Т.И. Влияние механического и местного радиационного повреждения на гематологические и иммунологические показатели в эксперименте. Експерим. і клін. медицина

Страницы:
1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50 


Похожие статьи

Автор неизвестен - 13 самых важных уроков библии

Автор неизвестен - Беседы на книгу бытие

Автор неизвестен - Беседы на шестоднев

Автор неизвестен - Богословие

Автор неизвестен - Божественность христа