Автор неизвестен - Анатолій якович циганенкодо 75-річчя від дня народження - страница 35

Страницы:
1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50 

2000; 4: 11-13.

5. Губина-Вакулик Г.И., Звягинцева Т.В. Морфологические изменения кожи крыс после локаль­ного рентгеновского облучения. Експерим. і клін. медицина 2000; 3: 26-28.

ІМУНОЛОГІЧНА РЕАКТИВНІСТЬ ПРИ МІСЦЕВИХ ПРОМЕНЕВИХ УШКОДЖЕННЯХ ШКІРИ Т.В. Звягінцева

На моделі місцевого променевого ушкодження шкіри у щурів досліджено загальні і локальні імунологічні реакції. В імунологічній відповіді організму на місцеву променеву дію найбільш характерні зміни розвиваються у вогнищі і характеризуються пригніченням інфільтративних явищ. Порушення лейкоцитарної реакції вогнища виявляються в зменшенні акумуляції нейтрофілів і моноцитів, затриманні елімінації останніх. Персистуючі запальні явища лежать в основі неспроможності загоювання. Головні особливості загальних імунологічних реакцій пов'язані зі специфічними ланками імунітету: порушенням Т-системи, розвитком аутоімунних реакцій. Отримані дані дозволяють вважати локальну імунокорекцію найбільш перспективним методом лікування місцевих променевих порушень.

Ключові слова: місцеві променеві порушення, імунокорекція, загоювання.

IMMUNOLOGIC REACTIVITY IN LOCAL RADIATION SKIN INJURY T.V. Zvyagintseva

On the model of local radiation skin injury at the rats were researched general and local immunologic reactions. In the immunologic answer of organism on local radiation most typical changes develop in the nidus and they are characterized by an oppression of the infiltrative phenomena. The disturbance of leu-cocytic reaction in the nidus was characterized by reduction of accumulation neutrophils and monocyts and delay of elimination last. Persisting inflammation phenomena is the basis of disturbance healing. The basic features of general immunologic reactions are connected with specific mechanisms of immuni­ty: disturbances of T-system, development of autoimmune processes. The received data allow considering local immunocorrection as the most perspective method of local radiation skin injury treatment.

Key words: local radiation injury, immunocorrection, healing.

ЛИПИДНЫЙ СПЕКТР СЫВОРОТКИ КРОВИ И СУБКЛЕТОЧНЫХ ФРАКЦИЙ ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТЕ

Т.В. Горбач

Харьковский государственный медицинский университет

Показано, что в латентной стадии экспериментального гломерулонефрита происходит ускорение метаболизма липидов. В дальнейшем активируется синтез триглециридов и холестерола в печени при снижении их катаболизма. Развитие гломерулонефрита со­провождается снижением секреции фосфоинозитидов печенью и содержания их в сыво­ротке крови. Нарушение обмена фосфоинозитидов является возможной причиной раз­вития дислипопротеидемии при экспериментальном гломерулонефрите. Ключевые слова: гломерулонефрит, печень, липиды.

Изучение особенностей формирования дислипопротеидемий у больных гломеруло­нефритом (ГН) вне связи с нефротическим синдромом или хронической почечной недос­таточностью приобрело особую актуальность в последние годы, когда в литературе появи­лись данные об участии липопротеидов в раз­витии склеротических процессов в паренхи­ме почек [1], а гиперлипопротеидемию стали рассматривать в качестве одного из неиммун­ных механизмов прогрессирования ГН. Не­смотря на большое число работ, посвященных изучению особенностей липидного обмена при ГН [2-4], механизмы развития дислипопро-теидемии остаются неясными. В настоящее время основное значение в патогенезе уреми­ческой гиперлипопротеидемии придается на­рушению экстраренальных механизмов обме­на липопротеидов, в частности нарушению пе­риферического катаболизма липопротеидов низкой плотности. Большая часть исследова­телей склоняется к предположению о том, что в основе нарушений липидного обмена при ГН лежат особенности их биосинтеза печенью.

Целью данной работы явилось изучение спектра липидов сыворотки крови и субкле­точных фракций печени крыс при экспери­ментальном ГН.

Материал и методы. Работа выполнена на 80 крысах-самцах линии Вистар массой 150­180 г, содержащихся в стандартных услови­ях вивария. ГН моделировали путем однора­зового введения нефротоксической сыворот­ки в дозе 1,5 мл/100 г массы животного [2, 5]. Титр антипочечных антител сыворотки в ре­акции пассивной гемагглютинации составлял 1 : 2560, в реакции связывания комплемен­та — 1 : 1280. Животных выводили из экспе­римента на 4-е (латентная стадия заболева­ния), 8-е (разгар заболевания) и 20-е (подост-рая стадия) сутки после введения нефроток­сической сыворотки путем декапитации. Кон­трольной группой служили животные, кото­рым вместо нефротоксической сыворотки вво­дили физиологический раствор. Печень пер-фузировали охлажденной средой, содержа­щей 0,25 М трис-HCl (рН 7,5), измельчали в этой же среде в гомогенизаторе Поттера из рас­чета 1 г ткани в 2 мл среды. Субклеточные фракции получали путем дифференциально­го центрифугирования. Ядра осаждали цен­трифугированием при 50 с-1, 10 мин, супер-натант использовали для получения лизосо-мально-митохондриальной фракции (167 с-1, 20 мин), а из постмитохондриальной фракции осаждали микросомы (1750 с-1, 60 мин). Су-пернатант использовали как фракцию цитозо-ля. Субклеточные фракции суспендировали в среде, содержащей 0,125 М KCl и 0,02 М трис-HCl (рН 7,4), и использовали в дальнейшей ра­боте. Экстракцию липидов из субклеточных частиц и сыворотки крови производили по ме­тоду Кейтса [6]. Липиды фракционировали ме­тодом тонкослойной хроматографии на сили-когелевых пластинах в смеси гексан : диэтило-вый эфир : метанол : ледяная уксусная кисло­та (45 : 10 : 1 : 1,5) [6]. Выделение фосфолипи-дов и разделение их на фракции с помощью двумерной тонкослойной хроматографии в смеси хлороформ : метанол : вода (65 : 25 : 4) проводили по методу, описанному в [7].

Результаты. В микросомальной фракции печени на 4-е сутки после введения нефроток-сической сыворотки достоверно увеличивает­ся содержание общих липидов, свободного хо-лестерола (ХС), общих фосфолипидов (ФЛ) при снижении содержания свободных жир­ных кислот (табл. 1). Очевидно, в микросомах в этот период активируется синтез липидов, причем в наибольшей степени синтез ХС, фос-фатидилхолина (ФХ) и фосфатидилинозити-дов (ФИ). В цитозольной фракции печени

Таблица 1. Спектр липидов микросомальной, цитозольной и лизосомальной фракции печени крыс (n=30) при экспериментальном гломерулонефрите, (М±m) мг/г

Фракции

Контроль

4-е сут

8-е сут

20-е сут

 

 

Микросомальные

 

Общие липиды

4,58±0,33

6,07±0,28*

6.38±0,21*

6,72 ±0,27*

Свободный холестерол

0,19±0,01

0,32±0,02*

0,37±0,02*

0,48±0,02*

Эфиры холестерола

0,55±0,02

0,53+0,03

0,51+0,02

0,77+0,03*

Триглицериды

1,38±0,11

1,32+0,12

1,78+0,11*

2,03+0,12*

Свободные жирные кислоты

0,89±0,05

0,73±0,04*

0,81±0,05

0,70±0,03*

Общие фосфолипиды

1,45±0,12

2,06±0,08*

2,24+0,06*

2,01±0,12*

Фофатидилхолин

0,51±0,02

0,88±0,03*

0,83±0,02*

0,85±0,03*

Лизофосфатидилхолин

0,14±0,01

0,11±0,01

023±0,01

0,16±0,01

Фосфатидилинозитиды

0,10±0,01

0,29±0,02*

0,34±0,01*

0,09±0,004

Фосфатидилсерины

0,20±0,02

0,25±0,01

0,23±0,02

0,32±0,02*

Фосфатидилэтаноламины

0,29±0,02

0,26+0,02

0,30+0,03

0,34+0,02

Сфингомиелин

0,21+0,02

0,27+0,02

0,29+0,01

0,25+0,02

 

 

Цитозольные

 

Общие липиды

6,58±0,21

6,46±0,18

6.49±0,31

7,93±0,29*

Свободный холестерол

0,42±0,02

0,45±0,01

0,41±0,02

0,53±0,03*

Эфиры холестерола

1,58±0,11

1,61±0,07

2,07±0,01*

1,59±0,02

Триглицериды

2,12±0,11

2,06±0,08

2,09±0,01

2,87±0,01*

Свободные жирные кислоты

1,37±0,12

1,32±0,08

1,35±0,11

2,01±0,01*

Общие фосфолипиды

0,89±0,05

0,92+0,06

0,97+0,04

1,23+0,11*

Фофатидилхолин

0,30±0,02

0,33+0,02

0,21+0,01*

0,19+0,01*

Лизофосфатидилхолин

0,12+0,01

0,09±0,004

0,18±0,003

0,32+0,01*

Фосфатидилинозитиды

0,09±0,001

0,09±0,001

0,05±0,001*

0,04+0,001*

Фосфатидилсерины

0,11±0,01

0,15±0,01

0,19±0,02

0,18±0,01

Фосфатидилэтаноламины

0,16±0,01

0,18±0,01

0,19±0,01

0,18±0,01

Сфингомиелин

0,11±0,01

0,13±0,01

0,16±0,01*

0,32±0,01*

 

 

Лизосомальные

 

Общие липиды

8,29±0,32

11,76±1,00*

6.59±0,27*

8,63±0,43

Свободный холестерол

0,55+0,03

0,76+0,03*

0,37+0,01*

0,32+0,02*

Эфиры холестерола

1,11+0,10

1,85+0,12*

1,32+0,11

1,22+0,09

Триглицериды

2,35±0,14

3,48±0,25*

1,43±0,12*

1,79±0,12*

Свободные жирные кислоты

1,08±0,10

0,97±0,03

0,95±0,02

1,12+0,09

Общие фосфолипиды

3,00±0,22

4,60±0,33*

2,42±0,19*

4,08±0,22*

Фофатидилхолин

0,85±0,03

1,26±0,11*

0,52±0,06*

0,81±0,05

Лизофосфатидилхолин

0,48±0,02

0,98±0,03*

0,49±0,01*

1,46±0,11*

Фосфатидилинозитиды

0,21±0,01

0,49±0,02*

0,59±0,01*

0,40±0,03*

Фосфатидилсерины

0,45+0,03

0,57+0,01*

0,37+0,02*

0,47+0,02

Фосфатидилэтаноламины

0,55+0,02

0,72+0,03*

0,32+0,02*

0,52+0,03

Сфингомиелин

0,48±0,03

0,58±0,02*

0,20±0,01*

0,42+0,02

* Достоверно по сравнению с контрольной группой.в этот период достоверных изменений в содер­жании липидных фракций, по сравнению с контрольной группой животных, не отмечает­ся (табл. 1). В лизосомальной фракции печени на 4-е сутки эксперимента достоверно увели­чивается содержание всех изучаемых фракций липидов, причем в наибольшей степени ХС, ФХ, ФИ. Концентрация свободных жирных кислот снижена (табл. 1). В сыворотке крови в этот период достоверные изменения отмечают­ся только во фракции свободных жирных ки­слот, их уровень снижается в два раза (табл. 2). Таким образом, можно сделать вывод, что в ла­тентной стадии заболевания в печени ускоря­ется обмен липидов, увеличен как их синтез, так и деградация. Отсутствие изменений в ли-пидном спектре сыворотки крови в этот пери­од, вероятно, связано с повышением как сек­реции, так и катаболизма липидов.

В разгар заболевания (8-е сутки) в микро-сомальной фракции печени увеличивается со­держание общих липидов, триглицеридов (ТГ), общих ФЛ (преимущественно за счет ФХ и ФИ). В лизосомальной фракции печени сниже­но содержание общих липидов и ФЛ, причем концентрация всех фракций ФЛ (кроме ФИ) ниже, чем у контрольных животных, а концен­трация ФИ выше в 2,2 раза. В цитозольной фракции возрастает концентрация эфиров ХС, общих ФЛ. Следует отметить, что во фракции ФЛ отмечается снижение уровня ФИ и ФХ (по сравнению с их уровнем в контрольной груп­пе) и увеличение содержания фосфатидилсери-на, фосфатидилэтаноламина, сфингомиелина. В сыворотке крови в этот период отмечается увеличение ТГ, свободного ХС и эфиров ХС, об­щих ФЛ при значительном снижении уровня ФИ. Следовательно, в разгар заболевания ак­тивируется синтез липидов и снижается их ка­таболизм. По-видимому, секретируемые пече­нью липопротеиды (особенно липопротеиды высокой плотности, в которых наиболее высо­кий процент ФЛ) обеднены ФИ и ФХ.

На 20-е сутки заболевания в микросомаль-ной фракции печени увеличено содержание общих липидов, эфиров ХС и свободного ХС, ТГ, общих ФЛ. В цитозольной фракции пече­ни также отмечается увеличение содержания всех изучаемых фракций липидов при значи­тельном снижении уровня ФХ и ФИ. В лизо-сомальной фракции в этот период увеличено содержание общих ФЛ (преимущественно за счет лизо-ФХ и ФИ), снижено содержание ТГ и свободного ХС. Полученные данные свиде­тельствуют об увеличении синтеза всех фрак­ций липидов, значительном увеличении ката­болизма ФЛ. Причем катаболизм ФЛ, особен­но подфракции ФИ, значительно превышает их синтез. Очевидно поэтому в сыворотке кро­ви (табл. 2) снижено содержание ФИ и ФХ.

Обсуждение результатов. Как следует из полученных данных, нарушения липидного обмена появляются в разгар заболевания и увеличиваются в подостром периоде. В разгар заболевания увеличиваются синтез и секре­ция липидов печенью. При этом, по-видимо­му, нарушается их обратный захват и катабо­лизм, о чем свидетельствует снижение содер­жания изучаемых фракций липидов в лизосо-мах. На 20-е сутки нарушения липидного об­мена усугубляются: синтез ХС и ТГ преобла­дает над их катаболизмом, а для фосфолипи-дов (особенно для ФИ) катаболизм превыша­ет синтез. В результате, по-видимому, нару­шается состав секретируемых печенью липо-протеидов и, как следствие, отмечаются суще­ственные изменения в липидном спектре кро­ви. Следует отметить, что с момента разгара

Таблица 2. Спектр липидов сыворотки крови крыс (n=30) при экспериментальном гломерулонефрите, (М±m) мг/мл

Фракции

Контроль

4-е сут

8-е сут

20-е сут

Общие липиды

2ДЗ±0,19

2,04+0,12

2,46+0,11

3,49+0,19*

Свободный холестерол

0,07±0,01

0,07+0,01

0,091+0,001

0,12+0,01*

Эфиры холестерола

0,91±0,03

0,89±0,11

1,35±0,02?

2,02+0,10*

Триглицериды

0,71±0,02

Страницы:
1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12  13  14  15  16  17  18  19  20  21  22  23  24  25  26  27  28  29  30  31  32  33  34  35  36  37  38  39  40  41  42  43  44  45  46  47  48  49  50 


Похожие статьи

Автор неизвестен - 13 самых важных уроков библии

Автор неизвестен - Беседы на книгу бытие

Автор неизвестен - Беседы на шестоднев

Автор неизвестен - Богословие

Автор неизвестен - Божественность христа